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蒸发光散射检测器

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放大字体  缩小字体    发布日期:2021-05-31  浏览次数:519
核心提示:蒸发光散射检测器蒸发光散射检测器(evaporative lightscattering detector,ELSD)是20世纪90年代出现的新型通用型质量检测器,它

蒸发光散射检测器


蒸发光散射检测器(evaporative light—scattering detector,ELSD)是20世纪90年代出现的新型通用型质量检测器,它适用于检测挥发性低于流动相的组分,主要用于检测糖类、高级脂肪酸、磷脂、维生素、氨基酸、甘油三酯及甾体等,并在没有标准品和化合物结构参数未知的情况下检测未知化合物。对各物质有几乎相同的响应,但是其灵敏度比较低,尤其是有紫外吸收的组分。此外流动相必须是挥发性的,不能含有缓冲盐等。它的通用检测原理克服了常见于HPLC传统检测方法的不足,已越来越多地应用于HPLC、超临界色谱和逆流色谱中。不同于紫外和荧光检测器,ELSD的响应不依赖与样品的光学特性,任何挥发性低于流动相的样品均能被检测,不受其官能团的影响。灵敏度比示差折光检测器高,对温度变化不敏感,基线稳定,适合与梯度洗脱液相色谱联用。

 

(1)ELSD检测原理

ELSD运行有三个过程:第一是雾化过程,用惰性气体或净化空气将色谱柱流出物雾化;第二是蒸发过程,在一个加热管(漂移管)中将流动相挥发;第三是检测过程,测定留下来的样品颗粒的光散射。所有商品ELSD都由一种或两种模式完成这三个过程。模式A的操作是全部柱流出物(气溶胶)都进入直的漂移管,让流动相在其中蒸发,模式B中是将气溶胶通过一个弯管,在此管中大的颗粒沉积下来流入废气管,其余的小颗粒进入螺旋状的漂移管,在上述两种模式中,样品颗粒均进入光管,使激光发生散射而得以检测。

 

(2)ELSD检测的优点及缺点

优点:

①具有较好的通用性,任何挥发性低于流动相的样品均能被检测;

②在相同色谱条件下,物理性质相似的物质可给出一致的响应;

③能与梯度洗脱方式相容;

④灵敏度高于示差折光检测器、紫外末端吸收检测法。

⑤在ELSD上开发的实验方法移植到质谱上则无需修改。

ELSD检测的不足之处主要是:

①灵敏度不够理想;

②流动相的选择受限;

③某些样品线性范围较窄等。



(3)影响ELSD检测性能的基本因素

①操作模式选择,选择合适的操作模式可提高方法的灵敏度,操作模式的选择取决于样品的挥发性、流动相的组成及其流速。

②流动相组成及流速选择,流动相的挥发性越好,方法的灵敏度越高。流动相的流速越低,相应的信号越强。

③漂移管温度对基线水平和噪音的影响并无明显规律性。最优温度应为在流动相基本挥发基础上,产生可接受噪音的最低温度。

④载气流速是影响检测性能的一个很重要因素。最优载气流速应是在可接受噪音的基础上(例如0.5mV),产生最大检测响应值时的最低流速。



(4)ELSD检测时的数据处理模式

ELSD检测最常采用的数学模型是lgy=algx+b (y为响应值,x为进样量或样品浓度,a、b为回归常数),也有采用二次曲线模型的(y=ax2+bx+c)。由于响应值(y)与进样量(x)之间并非线性关系,故其数据处理不同于紫外检测方法。ELSD测定已知物质的含量时,一般应用随行标准曲线法而非外标法,因为校正线性方程的截距并不为零。新药基准品的建立,除了对照品为另外一种含量已知、结构相似的物质外,数据处理方式同上相似。ELSD测定物质纯度时,由于响应值与进样量间并非线性关系,多通过绘制其中的一种或数种物质的随行标准曲线来加以校正。多组分物质的分析,除了随行校正曲线的线性范围有所区别外,数据处理同上类似。尽管存在一些不足之处,但是ELSD作为一种新型的通用型质量检测器,具有许多独特的优势,例如它的通用性,响应因子的一致性以及与梯度洗脱相容等,将在无特征紫外吸收物质的分析方面发挥越来越重要的作用。


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